2006-05
29

最后的埋片

By xrspook @ 19:55:17 归类于: 烂日记

埋片

微生物这一阶段的实验今天终于搞定,最后的操作是——埋片。上次因为盖玻片被水粘在一起于是进行不下去,今天终于把这一阶段要做的事情都做了。本来打算从网上找有关“埋片”的图片的,但搜出来的东西都是乱七八糟,于是就自己用Photoshop来DIY,还不错吧,用了50%的透明来表示盖玻片挺好,而那个用了黄色胶体的应用样式来表示圆形的培养基,大概差不多吧,但如果真的培养基真的有那么“反光”那么我们的倒平板也太有“水平”了,因为只有四周低中间高的东西才会如此反光。当然,我们倒的平板是很过关的,应该全部都是平的,不存在那么夸张的反光。而中间的挖空槽白色纯粹是和底色黑色及培养基形成鲜明对比,实际上应该是透明的。这个图画得这么好,看来埋片这个效果图也很明白吧。

其实埋片呢,说难不难,我觉得比叫我划平板好多了,但操作相对于平板划线相对麻烦,而且要准备的东西也要明显比平板划线多。比如说要有倒好的培养基,目标菌种,镊子,竹签,盖玻片。其中所有的东西除了镊子和菌种都要经过灭菌,而灭菌的方法则有差别,于是加起来消耗的时间就不少。比说我们搞了一个星期五,再加一个星期一上午完成的就是准备而已,培养基需要配制和灭菌,其它的,比如说培养皿、竹签、盖玻片也需要不同方式的灭菌。真正的操作我倒觉得挺好,特别是盖那个盖玻片,我觉得很容易上手。

埋片的操作先是要用灭菌的竹签在培养基上挖一个槽,不能太宽,太宽了盖玻片就不能架在上面,然后就需要用同一根竹签挑取目标菌种,把菌种涂在槽的内侧和表面,最后用盖玻片盖上就行。由于挑取的是放线菌,所以就必须在挑取菌种的时候连同挑取地的培养基一同挑出来,我觉得这就是难度所在,特别是那些一粒粒的,不是很密的那些,为了搞到一粒就不得不把培养基弄烂一点。某一处烂得好难看,好像有点对不起老师,把他心爱的放线菌弄得不成样子。除了挑菌,挖坑也很讲技巧,你要“快准狠”,快,当然要快,要不杂菌都进去了根本就不用继续操作;准,只要你一下签就必须开始画,画两个长线段,然后再用两段短线段连接,要准你画出来的坑才能方正,才会好看,虽然,好不好看不怎么影响,但如果你挖的坑凹凸不平会使你后续的涂菌造成麻烦;狠,一定要狠,既然下签了就要一次到底,凶一点没关系,培养皿不会穿的,特别是对那些平板特别厚的那种,否则那个培养基就会在你挖的过程中发生转动,不要忘了你的培养皿是圆的,于是培养基就在里面打转,十分影响效果。

今天和Shirley花了大概1个小时就把11个目标菌株埋片到33个培养基里。

但今天的竹签和盖玻片灭菌则花费我们不少时间,因为灭菌15分钟后突然院楼停电了,所有灭菌操作停止,于是就只能全部重来。当时真怕会一天都没电那么我们就又白去一趟了,幸好过了大概15分钟就恢复了,谢天谢地。

总的来说,今天还算顺利,虽然有点小波折,但相比于之前的大波折这已不算什么了,还好,还好。

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